¿Cuál es el método de ELISA?

El método ELISA es una prueba que se utiliza en y otras disciplinas científicas para detectar anticuerpos y . ELISA significa enzima de ELISA , que se refiere al hecho de que los anticuerpos junto a las enzimas se utilizan para determinar los resultados de la prueba. El método ELISA se utiliza en medicina para detectar anticuerpos contra las enfermedades como una medida de diagnóstico, y es una técnica común en la investigación inmunológica y bioquímica.

La fue desarrollado en los años 1960 y 1970 como un reemplazo de Las pruebas inmunológicas, que implicaba el uso de anticuerpos radiactivos y antígenos. Los riesgos de la utilización de materiales radiactivos hizo el engorroso proceso de pruebas peligrosas, y el advenimiento del método ELISA resuelto ambos problemas. En lugar de utilizar material radiactivo para determinar los resultados de una prueba, la prueba ELISA utiliza enzimas que reaccionan con anticuerpos para formar productos de color. El desarrollo de color en una prueba ELISA que indica un resultado positivo.

Hay varios tipos diferentes de pruebas de ELISA. El método ELISA más comúnmente usado es conocido como la prueba ELISA indirecta ; se trata de una para determinar si un determinado tipo de anticuerpo está presente en una muestra, y en qué concentración. En la medicina de diagnóstico, esta prueba se utiliza para detectar la presencia de anticuerpos contra enfermedades infecciosas como el VIH, la hepatitis, y otros. La presencia de anticuerpos frente a estas enfermedades indica que la persona se está probando se ha expuesto a los agentes infecciosos. Típicamente, la muestra utilizada es de sangre de un paciente.

En esta prueba, una proteína del antígeno específico se usa para recubrir una placa de microtitulación. Esta pequeña placa de plástico contiene 96 pozos pequeños, y una prueba de ELISA solo puede llevarse a cabo en cada pocillo. El antígeno utilizado para una prueba determinada depende del tipo de anticuerpo de la prueba está tratando de detectar. Por ejemplo, si la prueba ELISA se utiliza para la prueba del VIH, el antígeno utilizado es específico para este virus.

A medida que avanza la prueba, pequeñas cantidades de la muestra desconocida se añade a cada pocillo de la placa de microtitulación , y se incuba la placa para dar tiempo a los anticuerpos en la muestra que se unen al antígeno. A continuación, un anticuerpo de detección secundaria se añade a la placa de cada pocillo de la. Si la muestra contiene alguno de los tipo de anticuerpo que está siendo probado para, va a obligar a la detección de anticuerpos secundaria durante el período de incubación posterior.

La clave para el método de ELISA es que el anticuerpo secundario marcado con un tipo particular de enzima. La enzima utilizada es capaz de cambiar el color de la muestra cuando reacciona con su sustrato. Por lo tanto, si una muestra contiene alguno de los anticuerpos están probando para, añadir el sustrato de un bien hará que cambie de color debido a la presencia del anticuerpo secundario y sus enzimas asociadas.

Hay otras variaciones en el método de ELISA, incluyendo una prueba llamada ELISA de captura. Esto se usa para detectar antígenos en una muestra, en lugar de anticuerpos. En esta prueba, la placa de microtitulación se recubre con una muestra normalizada de anticuerpos. A continuación, la muestra de la prueba del antígeno se añade, seguido por la adición del anticuerpo de detección de secundaria y sus enzimas asociadas. Al igual que con la prueba ELISA indirecta, la formación de un producto de color indica un resultado positivo.

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